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【考频指数】★★★
1.流式细胞术:是用荧光活化细胞分类仪(FACS)通过细胞表面CD分子的检测而对细胞进行分类和定量的方法。
2.增殖试验:
1)3H-TdR掺入法:在体外培养的条件下,T淋巴细胞受特异性抗原或非特异性有丝分裂麻如刀豆蛋白A(ConA)刺激后可发生大量增生,转化为淋巴母细胞。在此过程中,T细胞的DNA合成明显增加,加入氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)会被掺入DNA分子中。
2)MTT比色法:MTT是一种噻唑盐,淡黄色可溶性物质。细胞增殖时,线粒体中的琥珀酸脱氢酶将MTT还原为紫褐色的甲臜颗粒,该颗粒被随后加入的异丙醇或二甲基亚砜所溶解。
3.细胞毒试验:用细胞毒试验可检测CTL和NK细胞的靶细胞杀伤活性,具体的做法是:将效应细胞(CTL或NK)和用51Cr标记的靶细胞相互作用4小时,被杀伤的靶细胞可释放51Cr。测定培养上清中51Cr放射性可判定细胞毒的强弱,放射性越高代表细胞毒活性越强。
4.细胞凋亡检测
1)琼脂糖凝胶电泳法
2)FACS法
3)TUNEL法
5.细胞因子的生物活性检测
1)细胞增殖法:可用细胞增殖法检测细胞因子的促细胞生长活性。
2)细胞病变抑制法:可采用细胞病变抑制法检测干扰素的抗病毒活性。
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