常见病毒检查方法主要包括以下几类:
一、形态学检查
1. 光学显微镜检查:可用于观察病毒感染细胞后形成的包涵体,如狂犬病病毒感染神经细胞后形成的内基小体,有助于初步判断病毒感染。不过光学显微镜分辨率有限,不能直接观察到病毒颗粒。
2. 电子显微镜检查:
- 透射电子显微镜:能清晰观察病毒的形态、大小和结构,可用于病毒的快速诊断和新病毒的发现。例如在诊断某些病毒性出血热时,通过观察病毒的典型形态来辅助诊断。
- 扫描电子显微镜:主要用于观察病毒感染细胞表面的变化,了解病毒与细胞的相互作用。
二、病毒的分离培养与鉴定
1. 动物接种:将标本接种到易感动物体内,观察动物的发病情况。如用小鼠脑内接种来分离狂犬病病毒。但动物接种存在成本高、周期长以及伦理等问题。
2. 鸡胚培养:不同日龄的鸡胚可用于不同病毒的培养,如流感病毒可接种于鸡胚尿囊腔或羊膜腔进行培养。鸡胚来源方便、操作简单,在病毒学研究和疫苗制备中应用广泛。
3. 细胞培养:是目前最常用的病毒培养方法。根据细胞来源和特性可分为原代细胞、二倍体细胞和传代细胞。原代细胞如猴肾细胞常用于分离多种病毒;二倍体细胞可用于制备病毒疫苗;传代细胞如HeLa细胞,生长迅速,可用于病毒的大量培养和研究。病毒在细胞中生长可出现细胞病变效应(CPE),如细胞变圆、溶解、脱落等,可根据CPE的特点初步判断病毒种类。
三、免疫学检查
1. 抗原检测:用已知的抗体检测标本中的病毒抗原。常用方法有免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。免疫荧光法可在荧光显微镜下直接观察病毒抗原的存在部位;ELISA具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,广泛应用于临床病毒感染的诊断。
2. 抗体检测:检测患者血清中特异性抗体。一般采用双份血清,即急性期和恢复期血清,若恢复期血清抗体效价比急性期升高4倍或以上,则具有诊断意义。常用方法有中和试验、血凝抑制试验、补体结合试验