免疫透射比浊法的原理与方法评价是什么?为了帮助检验职称考生了解,医学教育网为大家整理如下:
(一)原理
可溶性抗原抗体反应后形成的免疫复合物,使介质浊度发生改变,光线通过抗原抗体反应后的溶液时,被其中的免疫复合物微粒吸收,在保持抗体过量的情况下,吸光度(A值)与免疫复合物量呈正相关。与已知浓度的抗原标准品相比较,可确定标本中抗原的含量。
仪器工作过程
1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。
2.将待测标本和标准抗原溶液(5个浓度抗原标准品)与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在340nm处测定各管吸光度。
3.按方程进行曲线拟合,制备剂量-反应曲线,由计算机处理,计算出抗原浓度。
(二)方法评价
1.优点:灵敏度比单扩法高,操作简便,结果准确,且能用全自动或半全自动生化分析仪进行检测。
2.不足:①抗体用量较大;②溶液中IC分子若过小则阻挡不了光线的通过;若数量太少则对光通量影响不大;灵敏度较散射比浊法低;③透射比浊测定在抗原-抗体反应的第二阶段,检测需在抗原-抗体反应达到平衡后进行,耗时较长。
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