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荧光抗体与抗原反应,一般在25~37℃,30分钟,不耐热抗原的检测则以4℃过夜为宜。
(一)直接法
用特异荧光抗体直接滴加于标本上。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,需制备特异性的荧光抗体。
(二)间接法
可用于检测抗原和抗体,普通一抗+荧光二抗。灵敏度高,仅需一种荧光抗体。
(三)双标记法
FITC及罗丹明分别标记不同的抗体,而对同一标本做荧光染色。
(四)荧光抗体染色结果判断
在每次实验时均需设立实验对照(阳性和阴性对照)。阳性细胞的显色分布有胞质型、胞核型和膜表面型三种类型。临床上根据特异性荧光强度达“+”(为荧光较弱但清楚可见)以上判定为阳性。
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