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荧光抗体与抗原反应，一般在25～37℃，30分钟，不耐热抗原的检测则以4℃过夜为宜。
（一）直接法
用特异荧光抗体直接滴加于标本上。本法操作简便，特异性高，非特异荧光染色因素少；缺点是敏感度偏低，需制备特异性的荧光抗体。
（二）间接法
可用于检测抗原和抗体，普通一抗＋荧光二抗。灵敏度高，仅需一种荧光抗体。
（三）双标记法
FITC及罗丹明分别标记不同的抗体，而对同一标本做荧光染色。
（四）荧光抗体染色结果判断
在每次实验时均需设立实验对照（阳性和阴性对照）。阳性细胞的显色分布有胞质型、胞核型和膜表面型三种类型。临床上根据特异性荧光强度达“＋”（为荧光较弱但清楚可见）以上判定为阳性。
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