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HRP最为敏感的色原底物是OPD。
四甲基联苯胺(TMB):TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色,最大吸[医学教育网原创]收峰波长为450nm。TMB具有稳定性好,成色无需避光,无致突变作用等优点,已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。缺点是水溶性差。
邻苯二胺(OPD):OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下显橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物。
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