标记方法：
（1）标记抗体、抗原：常用于标记抗体的活化生物是BNHS；对于偏酸性的抗原，标记时多采用BHZ；
（2）标记酶：以生物素标记HRP为例。
标记注意事项：
（1）应根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件；
（2）标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当的比例；
（3）为减少空间位阻影响，可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构；
（4）生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后，不影响后者的免疫活性；标记酶时则结果有不同。
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