照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录Ⅵ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇0.1%磷酸溶液(80:20)为流动相:检测波长为288nm。理论板数按大黄素峰计应不低于5000。 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量,加乙醇制成每1ml含大黄素0.05mg的溶液,摇匀,即得。 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中.加乙醇20ml,超声处理(功率250W,频率25kHz)1小时,放冷,滤过,滤液置50ml锥形瓶中,药渣用乙醇洗涤3次,每次10ml,洗液并入滤液中,挥去乙醇,残渣加稀盐酸10ml使溶解,再加氯仿20ml,加热回流1小时,冷却,移置分液漏斗中,用少量氯仿洗涤容器,并入分液漏斗中,分取氯仿液,酸水液用氯仿洗涤2次,每次10ml,合并氯仿液,挥干,残渣精密加乙醇10ml,称定重量,微热使溶解,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取滤液,即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得。 本品每粒含大黄以大黄素(C15H10O5)计,不得少于0.30mg。