辅助检查
一、血常规及生化检查
由于失水引起红细胞、血红蛋白及红细胞压积增高,白细胞计数10~20×109/L或更高,中性粒细胞及大单核细胞增多。血清钾、钠、氯化物和碳酸盐均降低,血pH下降,尿素氮、肌酐升高。治疗前由于细胞内钾离子外移,血清钾可在正常范围内,当酸中毒纠正后,钾离子移入细胞内而出现低钾血症。
二、尿常规
可有蛋白、红白细胞及管型。尿比重为1.010~1.025之间。
三、血清学检查
血清凝集试验。在发病第1~3日及第10~15日各取1份血清,若第2份血清的抗体效价比第1份增高4倍或4倍以上,有诊断参考价值。
四、病原菌检查
1、涂片染色 取粪便或早期培养物涂片作革兰染色镜检,可见革兰阴性稍弯曲的弧菌。
2、悬滴检查 将新鲜粪便作悬滴或暗视野显微镜检,可见运动活泼呈穿梭状的弧菌。
3、制动试验 取急性期病人的水样粪便或碱性胨水增菌培养6小时左右的表层生长物,先作暗视野显微镜检,观察动力。如有穿梭样运动物时,则加入O1群多价血清一滴,若是O1群霍乱弧菌,由于抗原抗体作用,则凝集成块,弧菌运动即停止。如加O1群血清后,不能制止运动,应再用O139血清重作试验。
4、增菌培养 所有怀疑霍乱患者粪便,除作显微镜检外,均应作增菌培养。留取使用抗菌药物之前粪便,尽快送到实验室培养。培养基一般用pH8.4的碱性蛋白胨水,36~37℃培养6~8小时后表面能形成菌膜。此时应进一步作分离培养,并进行动力观察和制动试验,这将有助于提高检出率和早期诊断。
5、分离培养 用庆大霉素琼脂平皿或碱性琼脂平板。前者为强选择性培养基,在36~37℃条件下,培养8~10小时霍乱弧菌即可长成小菌落。后者则需培养10~20小时。选择可疑或典型菌落,应用霍乱弧菌“O”抗原的抗血清作玻片凝集试验。
6、核酸检测 通过PCR技术检测霍乱弧菌毒素基因亚单位CtxA和毒素协同菌毛基因(TcpA)来区别霍乱菌株和非霍乱弧菌。然后根据TcpA基因的不同DNA序列来区别古典生物型和埃尔托生物型霍乱弧菌。4小时内可获结果,可检出每毫升碱性蛋白胨水中10条以下霍乱弧菌。
诊断要点
依据患者的流行病学史、临床表现及实验室检测结果进行综合判断。
一、流行病学史是指:
1、生活在霍乱流行区、或5d内到过霍乱流行区、或发病前5天内有饮用生水或进食海(水)产品或其他不洁食物和饮料史。
2、与霍乱患者或带菌者有密切接触史或共同暴露史。
二、带菌者:无霍乱临床表现,但粪便、呕吐物或肛拭子细菌培养分离到O1群和或O139群霍乱弧菌。
三、疑似病例:
1、与霍乱患者或带菌者有密切接触史或共同暴露史,并出现霍乱轻症病例临床表现者。
2、具备霍乱轻症病例临床表现并且粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱毒素基因PCR检测阳性
3、具备霍乱轻症病例临床表现并且粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱弧菌快速辅助检测试验(胶体金快速检测)阳性
4、具备中毒型病例临床表现并且粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱毒素基因PCR检测阳性
5、具备中毒型病例临床表现并且粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱弧菌快速辅助检测试验(胶体金快速检测)阳性
6、具备中、重型病例临床表现者
四、临床诊断病例
1、具备各型霍乱临床表现之一,并且在腹泻病患者日常生活用品或家居环境中检出O1群和或O139群霍乱弧菌。
2、在一起确认的霍乱暴发疫情中,暴露人群中出现任一型霍乱临床表现者。
五、确诊病例
1、具备任一型霍乱临床表现,并且粪便、呕吐物或肛拭子细菌培养分离到O1群和或O139群霍乱弧菌
2、在疫源检索中,粪便培养检出O1群和或O139群霍乱弧菌前后各5天内有腹泻症状者。
鉴别诊断
常见的鉴别诊断如下。
一、急性胃肠炎:包括产肠毒素的副溶血性弧菌(致病性嗜盐菌)、O139群以外的非O1群霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、梭状杆菌等,均可引起食物中毒性感染。多数有食用不洁食物史,同餐者往往集体发病,起病急骤,早期常有发热和其他中毒症状。先有呕吐而后腹泻,排便前往往有肠鸣、阵发性腹部剧痛,大便不是米泔样,常为水样或类似痢疾样脓血便,个别重型患者大便可有清水样或洗肉水样(特别是副溶血性弧菌所致者),很少发生肌肉痉挛、虚脱和高氮质血症。
二、急性细菌性痢疾:痢疾杆菌侵袭肠黏膜,引起肠黏膜炎症及溃疡,并由此排出炎性渗出物,临床上常见有发热,大便为黏液、脓血便,量少,有腹痛及里急后重。大便镜检有大量的脓细胞。也有以水泻为主、里急后重不明显的不典型患者。大便培养痢疾杆菌阳性。
三、大肠杆菌性肠炎:
1.产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)性肠炎,潜伏期4~24小时,有发热、恶心呕吐及腹部绞痛,腹泻每日10次左右,黄水或清水样便,无脓血便,严重腹泻者亦可产生重度脱水,婴幼患儿常因此而危及生命。
2.肠致病性大肠杆菌(EPEC)性肠炎,大便为水样或蛋花汤样,重者也会有脱水及全身症状。
两者粪便培养均可获得相应的大肠杆菌。
四、鼠伤寒沙门氏菌感染:侵犯各年龄组,6个月以内婴儿易罹患,新生儿发病尤为严重,多发生于5~8月份,可有发热、腹泻或败血症,腹泻每日2~20次,大便为稀水便,亦可有脓血便,常引起不同程度脱水,大便培养可获得鼠伤寒沙门氏菌。
五、空肠弯曲菌肠炎:本菌可侵袭空肠及结肠引起病变。现已证实本菌亦可产生肠毒素而致病,潜伏期3~5日,起病初期有发热或有乏力、头痛及肌痛等症状,继而腹痛腹泻,大便为水样、黏液状、胆汁样或呈血性。严重病例可有重度脱水及循环衰竭。个别患者还可表现为急腹症。一般典型病例不难与霍乱鉴别,大便培养可有弯曲菌阳性。
六、耶尔森氏菌、气单胞菌及其他寄生虫性肠炎:有时也需与之进行鉴别。
七、病毒性肠炎:常见病原为人轮状病毒,侵犯各年龄组,多见于婴幼儿,好发于秋冬季,可呈流行性。