蛇胆一般位于蛇颈与肛门之间稍微偏后的位置，大者如拇指，小如花生米。取胆时，可用左脚踩住蛇尾，手执蛇头使其腹面朝上；然后，用大拇指由上而下轻轻触摸，若摸到一个稍微坚实、且有滚动感的圆形物，那就是胆囊。应用锋利的剪刀剪开一处小口，探手将蛇胆抠出。摘取时，应连同分理出的胆管一起取下，并将胆管自然打结或用线系住，以防胆汁外逸。摘取胆囊的蛇，大多当时不死，健康的还可存活数日。
不会取胆的人，往往会把蛇胆弄破；即使不破，胆囊也不会十分饱满。下面介绍两种简易的取胆操作方法，即可获得饱满的蛇胆。
1、激蛇胀胆术
取胆前，先将蛇激怒，因发怒的蛇胆囊急剧膨胀，胆汁充沛。所以，要想取得大而饱满的蛇胆就要临时促其发怒。
2、饿蛇养胆术
将准备取胆的蛇另关一处，只供饮水不给食物，让其饿1~2周后剖腹取胆。这样，由于胆汁不分泌消化食物了，故胆囊要比饱腹时大许多且胆汁饱满。
