方法名称: 银杏叶提取物-萜类内酯的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶提取物中萜类内酯的含量。
本方法适用于银杏叶经加工制成的提取物。
方法原理: 本品加乙酸乙酯提取,合并提取液回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用蒸发光散射检测器检测,计算出其含量。
试剂: 1. 甲醇
2. 正丙醇
3. 四氢呋喃
4. 2%盐酸溶液
5. 乙酸乙酯
6. 5%醋酸钠溶液
仪器设备: 1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按白果内酯峰计算应不低于2500。
1.3 蒸发光散射检测器
2色谱条件
2.1流动相:正丙醇 四氢呋喃 水=1 15 84
2.2柱温:室温
试样制备: 1. 称取供试品
精密称定本品0.15g,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量,加甲醇制成每1mL各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液;或精密称取已标示白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C含量的银杏叶对照提取物0.15g,照供试品溶液的制备方法,同法制成对照提取物溶液。
3. 供试品溶液的制备
取本品约0.15g,精密称定,加水10mL,置水浴中温热使溶散,加2%盐酸溶液2滴,用乙酸乙酯振摇提取4次(15 mL,10 mL,10 mL,10 mL),合并提取液,用5%醋酸钠溶液20 mL洗涤,分取醋酸钠液,再用乙酸乙酯10 mL洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗液,用水洗涤2次,每次20 mL,分取水液,用乙酸乙酯10 mL洗涤,合并乙酸乙酯液,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液(或对照提取物溶液)5mL、10mL,供试品溶液各5~10mL,注入高效液相色谱仪,用蒸发光散射检测器测定白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C,计算出其含量。