1、成人常用量肌内注射或静脉滴注，一次按体重1—1、7mg/kg，每8小时一次，疗程7一10天。危重感染患者可增加至每日8mg/kg，分次静滴，但病情好转后应尽早减量。
2、小儿常用量肌内注射或静脉滴注，按体重，出生0—7天者2mg/kg，每12小时一次；婴儿及儿童2mg/kg，每8小时一次。参阅硫酸庆大霉素。
(1)肌酐清除率在70ml/min以下者其维持剂量需根据测得的肌酐清除率进行调整。
(2)妥布霉素注射液必须经充分稀释后静滴，可将每次用量加入50—200ml5%葡萄糖注射液或氯化钠注射液稀释成浓度为1mg/ml(0、1%)的溶液，在30—60分钟内滴完（滴注时间不可少于20分钟），小儿用药时稀释的液量应相应减少。
(3)该品不宜皮下注射，因可引起疼痛。一般认为，该品的血药峰浓度超过12μg/ml和谷浓度超过2μg/ml时易出现毒性反应。1个疗程不超过7—10日。滴眼，每次1～2滴，每2h1次。涂眼，适量涂结膜囊内，1日2次，或临睡前涂1次。
