一、重组DNA技术的概述

（一）重组DNA技术相关的概念

1.DNA克隆

（1）酶学的方法结合体外来源的遗传物质成一具有自我复制能力的DNA分子，复制子。

（2）转化或转染宿主细胞，筛选出含目的基因的转化子细胞。

（3）扩增后获得大量同一DNA分子。

2.工具酶限制性内切酶：准确切割DNA，形成一定大小的DNA片段（2000）。

3.目的基因感兴趣的用于扩增的基因或DNA系列。

4.基因载体“携带”感兴趣的外源DNA、无性繁殖外源DNA或表达有意义的蛋白质所采用的DNA分子。质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA（2002）。

（二）基因工程的基本原理（2007）

1.获取目的基因化学合成、基因组DNA文库、cDNA文库、聚合酶链反应。

2.选择和构建克隆载体

3.连接外源基因和DNA黏性末端、平端连接、同聚物加尾、人工接头连接。医学教育网搜|索整理

4.重组DNA导入受菌体感受态细胞，转化、转染和感染。

5.筛选重组体可通过直接筛选、免疫学筛选等进行。

6.表达克隆基因原核体系、真核体系有所不同。

二、基因工程与医学

1.疾病相关基因的发现①根据基因定位克隆一个基因，确定克隆的基因在分子遗传病中的作用。②脆性X综合征及Kallmann综合征。

2.生物制药①用于有价值的蛋白质、多肽产品的生产。②构建适当的表达体系，表达有生物活性的蛋白质、多肽。

3.基因诊断①在DNA水平分析、鉴定遗传性疾病所涉及基因的突变。②基本过程分离、扩增待测DNA片段，用适当的分析手段区分或鉴定DNA的异常。③扩增待测DNA片段最常用方法PCR技术（2001）。

4.基因治疗①向有功能缺陷的细胞导入具有相应功能的外源基因，纠正或补偿其基因缺陷。②体细胞基因治疗和性细胞基因治疗。

5.遗传病的防治可用于产前诊断、携带者测试、症候前诊断、遗传病易感性等的检测。