方法:补体依赖的微量细胞毒试验(CDC)。分型抗原:SD抗原,包括HLA-A、B、C、DR、DQ.
(一)原理
标准血清+淋巴细胞,形成抗原抗体复合物,加入补体,在补体的作用下,细胞被溶解。溶解的细胞可被加入的染料(台盼蓝、伊红)着染,即为阳性反应,计数死细胞数,作出结果判断。
(二)技术要点
1.CDC试验的关键在于获得标准抗血清,与AB0血型抗体不同,主要获自经产妇。
2.抗血清种类应覆盖本民族、本地区80%以上的抗原。医学|教育网搜索整理
3.Ⅱ类抗原,仅分布于B细胞或巨噬细胞表面,故检测Ⅱ类抗原应分纯B细胞。
4.注意下列假象:
①粒细胞和单核细胞能够非特异性地,吞噬染料而造成着染假象,应注意细胞形态的区别。
②血小板与淋巴细胞竞争,结合HLA抗体而导致假阴性结果,可用玻璃珠脱纤维抗凝。
③红细胞沾染易致假阳性。④单克隆抗体复合物不能激活补体,不能用于CDC,可改用ELISA、FCM.
(三)临床应用
1.HLA配型可用于器官移植与相关疾病的诊断研究。
2.HLA交叉配型即用CDC法检测受体血清有无针对供者HLA的抗体,以监测排斥反应的发生或估价受体的敏感性。
3.群体反应性抗体的检测(PRA)PRA用于判断器官移植时受体的敏感程度。