维生素D摄入量不足可提示佝偻病，并有助于将佝偻病与婴儿坏血病及其他疾病鉴别。先天性梅毒（可用血清检查和其他试验鉴别）；软骨营养障碍则是根据头大，肢短，骨粗以及血清钙，磷酸酶的值均正常进行鉴别。
成骨不全，呆小病，先天性髋关节脱臼，脑积水以及脊髓灰质炎容易鉴别。婴儿佝偻病的明显手足搐搦症必须和其他原因引起的抽搐鉴别。用维生素D难以治愈的佝偻病可能是由严重肾脏损害引起，或在肾小管酸中毒，性连锁低磷酸盐血症或Fanconi综合征发生。
骨软化症必须和其他原因的广泛性脱骨钙相鉴别（如甲状腺功能亢进，老年性或绝经后的骨质疏松症，甲状腺功能亢进时出现的骨质疏松，Cushing综合征，多发性骨髓瘤以及废用性萎缩）。血清钙，磷酸根，碱性磷酸酶及25-羟维生素D3的变化，医学|教育网搜集整理结合X线检查即可诊断。
