腹腔穿刺术的操作步骤如下：

首先是术前准备。医生要向患者及其家属说明穿刺的目的、过程以及可能出现的并发症等情况，取得患者的配合，签署知情同意书。准备好消毒用品，如碘伏、酒精等，无菌穿刺包，包括穿刺针、注射器等，还有局部麻醉药如利多卡因，以及标本容器等。让患者排空膀胱，以免穿刺时损伤膀胱。根据患者情况选择合适的体位，如坐位、半卧位、平卧位或侧卧位。

然后进行穿刺点选择。常用的穿刺点有左下腹脐与髂前上棘连线的中、外1/3交界处，此处不易损伤腹壁动脉；脐与耻骨联合连线中点上方1.0cm、偏左或偏右1.5cm处，此穿刺点无重要器官且易愈合；侧卧位时在脐水平线与腋前线或腋中线的交点，常用于诊断性穿刺。

接着进行消毒与铺巾。常规消毒穿刺部位皮肤，以穿刺点为中心，由内向外进行消毒，消毒范围直径约15cm，共消毒2 - 3遍。铺无菌孔巾。

之后进行局部麻醉。用注射器抽取适量利多卡因，在穿刺点处自皮肤至腹膜逐层进行浸润麻醉。

穿刺操作。检查穿刺针是否通畅，用左手固定穿刺部位皮肤，右手持穿刺针经麻醉处垂直刺入腹壁，当针锋抵抗感突然消失时，表明针尖已进入腹腔，此时可抽取腹水或注入药物等。诊断性穿刺可直接用注射器抽取腹水送检；如进行治疗性放液，可在针座处接乳胶管，引腹水入容器中，放液速度不宜过快，放液量不宜过多。

穿刺结束后，拔出穿刺针，覆盖无菌纱布，稍用力压迫穿刺部位数分钟，用胶布固定。让患者卧床休息，观察患者有无头晕、恶心、心悸、气短等不适，以及穿刺部位有无渗血、渗液等情况。同时，将抽取的腹水标本及时送检。