梅毒诊断必须根据病史、临床表现和实验室检查进行综合分析后作出诊断。
病史：要重视本人及配偶的婚外性接触史、婚姻史、妊娠史、生育史、胎传梅毒应了解生母梅毒史。
临床表现：应注意自感染到发病的时间，患者皮肤粘膜、骨骼、眼、心血管系统和神经系统等表现，必要时与其他各专科配合检查。
实验室检查：暗视野显微镜检查，直接发现梅毒螺旋体有确诊价值，但阴性时不能排除。梅毒血清学试验包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验应为阳性，如感染不足2～3周，非梅毒螺旋体抗原试验为阴性，应于感染4周后复查。
具有病史和临床表现者为疑似病例，还应具备暗视野显微镜检查或血清学检查任何一项为阳性可确诊。少数三期梅毒非螺旋体抗原试验可阴性。诊断神经梅毒应该有脑脊液检查异常包括VDRL试验阳性。
