实验室诊断方法
A1 镜检
A1.1 粪便常规检查
A1.1.1 粪便性状
急性菌痢粪便量极少，为粘稠的脓血便和粘液便，无粪质；有时为稀便，水样便。
A1.1.2 镜检
A1.1.2.1 加生理盐水1～2滴于洁净玻片上，用牙签选择粪便不正常部分及不同部位，直接涂片。
A1.1.2.2 涂布面积不少于玻片大小的2/3，厚薄均匀。
A1.1.2.3 先用低倍镜观察，然后换高倍镜检查，急性菌痢粪便中，可见大量白细胞（或称脓细胞），一般平均每高倍镜视野≥15个，并可见红细胞。
A2 病原学诊断方法
A2.1 标本的收集
A2.1.1 患者粪便标本的收集
可采用便盒留便、肛拭或采便管采便。
便盒留便：留取粪便时应采集新鲜粪便的脓血部分、粘液部分、水样便或稀便。便量1～5g。
集体腹泻或食源性暴发患者粪便采集的数额，应根据患者人数的多少，决定采取标本的数量。
A2.1.2 当怀疑患者为菌血症时，应以无菌操作，从静脉血管采取10～15mL血液，放入加有EDTA抗凝剂瓶中送检。
所采取的粪便标本应尽快送检，不得超过2h送到化验室，否则标本应放入Cary－Blair运送培养基中，运送时间超过2h者，应在冰浴条件下送检。
A2.2 分离方法
A2.2.1 用接种环多点沾取标本病变部分，直接划线分离于SS、EMB（或HE、麦康凯）琼脂平板。37℃培养24h。
A2.2.2 血液培养
将采取的抗凝血液标本，放入葡萄糖肉汤，37℃培养，逐日观察结果。一般1～3d内阳性较高。
为提高阳性检出率，可以在标本中加入0.5mL OP乳化剂（聚乙二醇辛基苯基醚），使血球溶解，以提高阳性检出率。
A2.2.3 挑选可疑菌落
从37℃培养16～24h的分离培养基上，观察挑选可疑菌落，其形态为无色，半透明，圆形，湿润、光滑、突起，大小为1～2mm；挑选可疑菌落，接种TSI和葡萄糖半固体或综合培养基，先划线后穿刺，做好标记，放37℃培养16h以上，观察结果。
A2.2.4 初步生化反应
志贺菌属在TSI上的生化反应为：斜面红色，底层产酸黄色，不产气。在葡萄糖半固体管内产酸为黄色，不产气，无动力。在综合培养基上为：斜面红色中立段产酸黄色，底层绿色，无动力。福氏志贺菌6型在上述三种培养基中，有时可产生少量气体。
A2.3 生化学鉴定
A2.3.1 凡属志贺氏菌属的培养物，应符合生化特性。
A2.3.2 志贺菌属分为四个生化群。血清学分型与生化反应不一致者，均为非志贺菌。
A2.3.3 生化反应或血清学反应可疑的培养物，均应做革兰氏染色镜检，并加做V.P、苯丙氨酸、西蒙氏柠檬酸盐、赖氨酸和葡萄糖铵试验，与有关的细菌相鉴别。
A3 阿米巴痢疾病原学诊断方法
A3.1 直接涂片法
A3.1.1 取洁净载物玻片一张，在其中央滴生理盐水1～2滴。
A3.1.2 用竹签挑取一小块粪便，在盐水中涂抹成一个直径为1cm粪便薄膜。其厚度以通过粪便薄膜 能看清书报上的字为宜。
A3.1.3 盖上盖玻片后，显微镜下观察（天冷时注意玻片保温）。
A3.2 碘液玻片法涂片制法同A3.1，仅用碘液代替生理盐水而制涂片。包囊呈棕色，未成熟包囊的糖原泡呈棕色，核与囊壁不着色而透明。
A3.3 铁苏木素染色法
A3.3.1 用新鲜粪便于载物玻片上制成薄膜。
A3.3.2 立刻放入热至40℃邵氏固定液中，约3～5min.固定液温度低于40℃时需15～30min。
A3.3.3 再放入70％酒精中5～10min，然后移至70％碘酒精脱汞10min以上，使涂片变为棕色。
A3.3.4 放入70％酒精中1h或过夜，再放入50％酒精中5min。
A3.3.5 用流水轻轻冲洗10min，再用蒸馏水冲洗。
A3.3.6 放入热至40℃20g/L的铁明矾溶液中媒染2min或40g/L的铁明矾溶液中1～6h，自来水冲洗5min。
A3.3.7 移入5g/L的苏木素染色液中1至数小时或过夜，自来水冲洗5min。
A3.3.8 再放入20g/L的铁明矾溶液中20min，至颜色适当，细胞核清晰可见为止，再以流水冲洗5min。
A3.3.9 依次放入50％、70％、80％、90％、95％、100％酒精中各2～10min。
A3.3.10 放入二甲苯和纯酒精各半的溶液中及纯二甲苯中各约2min，以透明之。
A3.3.11 用中性树胶封片、干燥、镜检。
A3.4 染色结果
滋养体的核膜呈深蓝黑色，核仁与核膜之间清晰，核膜内染色质粒分明，细胞质蓝色，食物泡内含物为深蓝色。包囊为蓝色，核与滋养体清晰可见。红细胞呈红色，拟染色体呈深蓝黑色，糖原泡在染色过程中被溶解成空泡。
A3.5 培养检查法
A3.5.1 采取粪便标本，务求新鲜，所用器皿清洁干净。尿液或水勿混入粪便或容器内。
A3.5.2 标本采集，应选择脓血及粘液部分；比较正常的粪便，要采取不同部位。成形或半成形便应采取5～10g，放入便盒。液质或半液质粪便，可用小勺装入试管或标本瓶中。任何容器均应加盖，容器外面切勿沾染粪便。
A3.5.3 粪便采集后，应立即送检，务必在2h内进行检查。
A3.5.4 培养方法（多栖培养法）
A3.5.5 成形或半成形便，用灭菌的接种环取豌豆大小，接种于培养基的液体部分，并在管壁上轻轻研磨，使粪便混匀于液内。
A3.5.6 液质或半液质粪便则用灭菌吸管，吸取0.5mL粪液，接种培养基的液体部分中。
A3.5.7 放入37℃温箱，培养48h，用吸管取沉淀物一滴，作涂布检查。方法见A3.1。
A3.5.8 若检查结果为阴性，应从培养管底部吸取沉淀物0.5mL转种另一培养基中，再经48h培养后检查，仍为阴性，报告。
