常用的化学物致突变试验方法:
1.细菌回复突变试验-鼠伤寒沙门菌回变试验(Ames试验)
原核生物体外试验、基因突变。
鼠伤寒沙门菌试验菌株(突变型)不能自行合成组氨酸,在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长。突变型试验菌株可被各种诱变因素诱导,回复突变成野生型,即恢复了合成组氨酸的能力,可在此平皿上生长成可见菌落。
2.微核试验
体内试验,遗传学终点是染色体畸变和不分离。
微核是染色体断片或因纺锤体受损伤而迟滞的整个染色体,分裂的后期仍留在子细胞的胞质内。检测断裂剂和有丝分裂毒物。
常用的是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞。在主核排出时微核可留在胞浆中。
3.染色体畸变试验
细胞遗传学检验,即制备中期相染色体标本,在光镜下观察染色体形态结构和数目改变。遗传学终点为染色体畸变。
啮齿类动物睾丸细胞染色体畸变试验,用于检测对生殖细胞的染色体损伤作用。
4.程序外DNA合成试验
DNA受损后,发生在正常复制合成期(S期)以外DNA的修复合成,称为程序外DNA合成(UDS)或DNA修复合成。
3H-胸苷掺入量,反映DNA修复合成情况。需将受试细胞分裂阻断同步化于G1期,再用羟基脲抑制残存的S期半保留DNA复制,放射自显影法和液闪计数法确定3H-胸苷掺入量。