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标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后，单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团，称为菌落。
1、观察菌落：了解菌落的各个特征，以便确定对该菌如何进一步鉴别。菌落的各种特征，包括大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘、颜色、表面、透明度和粘度等。
2、血琼脂上的溶血：菌落溶血有下列3种情况。
①α溶血：菌落周围血培养基变为草绿色环，红细胞外形完好无损，为高铁血红蛋白所致。 ②β溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的溶血环，是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致。
③γ溶血：菌落周围的培养基没有变化，红细胞没有溶解或缺损。
④双环：在细菌周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二个圆圈。
3、气味：某些细菌在平皿培养基中生长繁殖后可产生特殊气味，如铜绿假单胞菌（生姜气味）、变形杆菌（巧克力烧焦的臭味）、厌氧梭菌（腐败的恶臭味）、白色假丝酵母菌（酵母味）和放线菌（泥土味）等，结合液体培养基上的性状，有助于细菌的鉴定。
