照高效液相色谱法（中国药典1990年版二部附录ⅤD）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用硅胶为填充剂；甲醇-醋酸铵缓冲液（取醋酸铵50mg，加水200ml使溶解，加浓氨溶液调节pH至9.1）（9∶1）为流动相；检测波长为284nm，理论板数按盐酸异丙嗪峰计算应不低于1900，盐酸异丙嗪与磷酸可待因峰的分离度应符合要求。
测定法 用内容量移液管，精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用少量流动相洗出移液管内壁附着液，洗液并入量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取经105℃干燥至恒重的磷酸可待因对照品约50mg，盐酸异丙嗪对照品约32mg置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算，井将磷酸可待因乘以1.068，即得。
