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（一）标本
根据感染部位不同采取不同标本，如痰液、脓液、血液、脑脊液等。
（二）直接涂片镜检
革兰染色后镜检。如果镜下可见到成双排列、有荚膜的革兰阳性球菌，结合临床症状可做出初步诊断。（早期鉴定有作用）
（三）分离培养
痰或脓液直接接种于血琼脂平板上，培养并鉴定。
（四）鉴别试验
肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌菌落相似，应加以鉴别。医`学教育网搜集整理常用的试验有以下几种：①菊糖发酵试验；②胆汁溶菌试验；③奥普托欣试验。
（五）动物试验
小鼠对肺炎球菌高度敏感。
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