1.培养液准备：取15ml培养瓶数个，每瓶内分别充入5ml培养液（pH7.2），内含：1640培养液（含10%～15%小牛血清），PHA0.1ml，青霉素100单位和链霉素100微克/毫升培养液
2.抽血针管准备：取2～5ml针管一支，在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器，无菌抽肝素（100U/mlBBS）少许湿润针管，如动作迅速不用肝素亦可。
3.采血：用棉签75%酒精给患者或献血者的皮肤消毒两次，缚止血带，静脉取血1～2ml.无菌操作迅速向每一瓶培养中加血0.4～0.5ml，如系外出采血，安装针管及分装血液两步骤亦可在无菌条件略差的环境内操作，但动作要迅速，以减少污染；在采血量不多或不应抽血的情况下，亦可在耳垂、手指肚（无名指）用刺血针采血。
4.培养和加秋水仙素：37℃温箱中培养到60～72小时之间，此时细胞分裂相最多，向每培养瓶内加秋水仙素，最终浓度0.02～0.08微克/毫升营养液，再培养4～6小时。
5.低渗：1000转/分钟离心10分钟，吸除上清液，加入预温过的0.075MKCl溶液10ml，医学教.育网搜集整理置温箱中低渗处理15～20分钟。
6.其余步骤与处理传代细胞法相同。
