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1.待细胞生长达一定数量后，倒出旧培养液，用胰酶消化后，Hanks冲洗2次，加入不含血清的培养液，吹打制成细胞悬液。
2.取编号为A、B、C三个培养瓶。首先把悬液接种入A培养瓶中，置温箱中静止培养5～20分钟后，轻轻倾斜培养瓶，让液体集中瓶角后慢慢吸出全部培养液，再接种入B培养瓶中后，向A瓶中补充少许完全培养液置温箱中继续培养。
3.培养B瓶中细胞5～20分钟后，按处理A的方法，把培养液注入C培养瓶中，医学教.育网搜集整理再向B瓶补加完全培养基。
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