1、总硒样品预处理：

准确称取混匀试样约 1.00g～2.00g 置于消化管中，同时做试剂空白。样品如含有乙醇等有机溶剂，先在水浴或电热板上低温挥发。若为膏霜型样品，可预先在水浴中加热使瓶壁上样品融化流入瓶的底部。加入数粒玻璃珠，然后加入硝酸（3.1）10mL，由低温至高温加热消解，当消解液体积减少到 2mL～3mL，移去热源，冷却。加入高氯酸（3.2）2mL～5mL，继续加热消解，不时缓缓摇动使均匀，消解至冒白烟，取下。稍冷后加入盐酸（3.4）4mL继续加热至产生白烟，立即取下。

2、标准工作溶液的制备

取硒标准使用溶液（3.17）0、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00、2.00mL 分别置于 100mL锥形瓶中，与样品同时消解。

3、测定

将消解的样品溶液及标准工作溶液分别转移到 50mL 比色管中。分别向各管加入混合试剂（3.11）10mL，摇匀，溶液应呈桃红色。用氨水（3.12）调至浅橙色，必要时可加入少量盐酸（3.4），此时溶液 pH 值应为 1.5～2.0[也可用 pH0.5～5.0 精密试纸（3.9）检验].（以下步骤需在暗室内进行）向上述各管内加入 2，3-二氨基萘溶液（3.14）1mL，摇匀，置沸水浴中加热 5min（自放入沸水浴中算起），取出，冷却。向各管中加入环己烷（3.13）

4.0mL，加塞盖严，振摇 2min.静置分层待测。用滴管分别吸取各管中的环己烷相，用荧光分光光度计在激发光波长 379nm，发射光波长 519nm 测定其荧光强度。

绘制工作曲线，从曲线上查出样品中硒含量。