确定白喉棒状杆菌是否产生毒素的依据是

A.奈瑟染色有异染颗粒

B.吕氏斜面快速长出灰白菌落

C.亚碲酸钾平板呈黑色菌落

D.锡克试验

E. Elek平板试验

【提问】平板实验是什么意思？

【回答】答复：琼脂平板毒力试验

琼脂平板毒力试验：又称 Elek平板毒力试验。将待检菌和对照产毒菌用平行划线法接种。平板中垂直铺一条浸有白喉抗毒素的滤纸片。温箱孵育 24～48小时，若待检菌能产生相应外毒素，则在滤纸条和长出的菌苔交界处出现白色沉淀线。此为毒力试验阳性

【追问】B选项怎么解释？

【回答】答复：您好，根据本题的要求及您的提问，我做出以下相关知识解答，希望对您的学习有所帮助，谢谢

白喉棒状杆菌(C. diphtheriae)属于棒状杆菌属,俗称白喉杆菌,是白喉的病原菌.

生物学性状

1.形态与染色 菌体细长微弯,一端或两端膨大呈棒状,排列不规则,常呈V和L等文字状.革兰染色阳性,用美蓝短时间染色菌体着色不均匀,出现有深染的颗粒.用Albert等法染色,这些颗粒与菌体着染颜色不同,称为异染颗粒,为本菌形态的主要特征,具有鉴别意义. 白喉棒状杆菌的异染颗粒

2.培养特性与生化反应 营养要求高,需氧或兼性厌氧,在含有凝固血清的吕氏血清斜面上生长良好.分离培养时常用鉴别选择培养基即含0.03%～0.04%亚碲酸钾的血平板.亚碲酸钾能抑制杂菌,且白喉棒状杆菌能吸收亚碲酸盐使其还原为元素碲,菌落呈黑色.

3.抵抗力 白喉棒状杆菌对湿热敏感,煮沸1min或加热60℃10min可致死.但对干燥和寒冷抵抗力强.在衣服,床单,玩具上可存活数天至数周.5%石炭酸中1min,3%来苏中10min死亡.对青霉素,红霉素及广谱抗生素敏感,对磺胺类药物不敏感.

致病性

1.致病物质

·索状因子 是白喉棒状杆菌表面的毒性糖脂,与结核分枝杆菌的索状因子结构和作用相似.

·白喉毒素 是白喉杆菌的主要致病物质.此毒素是外毒素,由A,B两个亚单位组成,A亚单位为毒素的活性中心,可使细胞内延伸因子2(elongation factor –2, EF-2)灭活,影响蛋白质的合成,从而使细胞变性和坏死.B亚单位是毒素与敏感细胞膜受体结合的部位.

白喉毒素并非由白喉分枝杆菌基因编码合成,而是由β-棒状噬菌体毒素基因(tox+)编码的.只有带有β-棒状噬菌体的溶原性白喉棒状杆菌才能产生白喉毒素.细菌失去该噬菌体即失去产毒能力.

2.所致疾病

白喉棒状杆菌存在于患者及带菌者的鼻咽腔中,随飞沫或污染的物品传播,易感者主要是儿童,多在秋冬季节流行.感染后细菌在鼻咽部粘膜上繁殖并产生毒素,引起局部炎症及全身中毒症状.细菌和毒素可使局部粘膜上皮细胞坏死,血管扩张,炎症细胞浸润,纤维蛋白渗出,形成灰白色膜状物,称为假膜.此假膜与粘膜下组织紧密相连不易拭去.若假膜扩展至气管,支气管粘膜,此处假膜易脱落阻塞气道而窒息,是白喉早期致死的主要原因.一般细菌不入血,但可形成毒血症,毒素与易感组织结合,在临床上引起各种表现,如心肌炎,软腭麻痹,声嘶,肾上腺功能障碍等.约2/3患者的心肌受损,多发生在病后2周～3周,成为白喉晚期致死的主要原因.

微生物学检查

用无菌棉拭采取假膜边缘处分泌物或带菌者鼻咽腔分泌物送检.

1.直接涂片镜检 将标本直接涂片,用美蓝或Albert法染色后镜检.若找到有异染颗粒的棒状杆菌,根据形态,排列特征,结合临床即可初步诊断.

2.分离培养 将棉拭取材接种于吕氏血清斜面,经37℃6～12h增菌后作染色镜检,有助于快速诊断.也可将棉拭标本或吕氏血清斜面上可疑菌落接种于亚碲酸钾血平板上,37℃培养,取菌落涂片染色镜检和毒力试验.

3.毒力试验 是鉴定产毒白喉棒状杆菌与其它棒状杆菌的重要试验,检测方法有琼脂扩散试验和动物试验.后者常用豚鼠作体内中和试验,取体重约250g的豚鼠2只,其中1只于试验前12h预先从腹腔注射白喉抗毒素250～500单位作为对照.然后2只豚鼠均于皮下注射待检菌的48h培养液2ml,观察2 d～4d,若试验动物死亡,而对照动物存活,说明待检菌株为产毒菌株.

【追问】锡克试验是什么？

【回答】答复：您好！

锡克试验的临床应用及意义：

对白喉具有免疫力的人，血清内含有白喉抗毒素，能中和白喉外毒素，消除其对组织的损害。皮内注入定量的白喉毒素，根据皮肤反应，可了解被试者对白喉的免疫状态，故锡克试验又称白喉毒素试验。试验时皮内注入白喉毒素0.1ml，以同量加热破坏的毒素作为对照，观察结果。

1.阴性反应 血清中因含有足量的抗毒素抗体，能中和注入的毒素，对一般接触感染有免疫力。

2.阳性反应 说明受试者无免疫力，其血循环中抗毒素很少或无。

3.假阳性反应 表示受试者有免疫力，但对毒素或其它杂质有变态反应。常见于成人或年龄较大的儿童。

4.混合反应 指示受试者无免疫力，其血循环中抗毒素水平低或无，而且受试者对毒素或试剂内其它蛋白质有变态反应。以居住在白喉流行区的无免疫人群最多见。

锡克试验可用于调查人群对白喉有无免疫力，凡阳性者均应给予白喉类毒素人工免疫，并用本试验测定其免疫效果。

如癌症病人厌油腻荤腥，可换些蛋白质含量丰富的非肉类食物，如豆类食品等；搓耳朵：双手分别搓捏两耳廓和内外部，有痛点处为捏的重点，从上到下要全部搓摩，在耳垂处手法不妨重一些，搓热搓红。常做耳部按摩，有强肾之功。

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★问题所属科目：临床执业医师---医学微生物学