【提问】检测IgE含量常用的简单方法是什么?
请问,什么情况下用单向免疫扩散法,什么情况下用ELISA法。
【回答】学员gdlj2011,您好!您的问题答复如下:
单向免疫扩散法:在含有特异抗体的琼脂板中打孔,并在孔中加入定量的抗原,当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合,既形成白色沉淀环,其直径或面积与抗原浓度呈正相关。同时用标准抗原或国际参考蛋白制成标准曲线,即可用以定量检测未知标本的抗原浓度(mg/ml或IU/ml)。
应用这一实验方法可检测正常人群或患者血清中IgG、IgA及IgM的含量及正常值医`学教育网搜集整理。
酶联免疫吸附试验(ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使抗原抗体反应在固相表面进行,通过洗涤将固相上的抗原抗体复合物与液相中的游离成分分开。
由于该法具有特异性高、敏感性强、操作方便等优点,目前已经广泛应用。已经有多种病毒的检测试剂盒,如各型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒和HIV等。
(1)双抗体夹心法:用于检查特异抗原。将已知抗体包被在酶联检测板上(固相),加入待检标本,标本中若含有相应抗原即与固相上的抗体结合,洗涤去除未结合成分,加入该抗原特异的酶标记抗体,洗去未结合的酶标记抗体,加底物后显色。酶联免疫测定法测定血清IgE时也常用双抗体夹心ELISA法,操作方便,敏感性也很高,在临床上经常应用。
(2)间接法:用于检查特异抗体。用已知抗原包被固相,加入待检血清标本,再加酶标记的二抗,加底物观察显色反应。
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★问题所属科目:公卫执业医师---医学免疫学