该项研究目的是研究蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803的增殖抑制作用以及对胃癌细胞与血管内皮细胞粘附性和粘附分子CD44v6表达的影响。
方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803增殖的影响;体外粘附实验观察蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞MGC803与血管内皮细胞ECV304粘附性的影响;流式细胞术观察蚯蚓纤溶酶作用于MGC803细胞后CD44v6蛋白表达的变化;RT—PCR法检测蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞CD44v6mRNA表达的影响。结果蚯蚓纤溶酶各用药组(2、4、8uku/ml)对MGc803细胞均有抑制生长作用(P〈0.01),且在一定浓度范围内呈剂量依赖关系。蚯蚓纤溶酶4、8uku/ml作用于MGC803细胞48h后,与对照组相比,胃癌细胞与血管内皮细胞的粘附性明显下降(P〈0.01)。2、4、8uku/ml蚯蚓纤溶酶作用后,CD44v6蛋白表达水平呈剂量依赖性下降,平均荧光强度分别为84.80±2.14、30.69±3.66、21.75±2.25,与对照组相比,差异均有统计学意义(P〈0.05或0.01)。DNA半定量分析表明,各实验组CD44v6mRNA表达也明显减少(P〈0.01)。
由此得出结论蚯蚓纤溶酶有抑制胃癌细胞增殖的作用,并可降低胃癌细胞与血管内皮细胞的粘附性、降低胃癌细胞粘附分子CD44v6的表达,提示蚯蚓纤溶酶可能具有潜在抗肿瘤转移作用。