该项研究目的是建立HBVHepG2肝细胞株，使HBV能长期稳定地表达抗原并复制。
方法将含完整转录单位的1.2倍体HBVDNA经Sal1位点克隆入真核表达载体pREP10，构建的重组载体pREP—HBV以Lipofemamine2000转染HepG2细胞，250μg／ml.潮霉素筛选抗性细胞克隆。ELISA检测细胞上清液中的HBsAg和HBeAg.电子显微镜下观察细胞上清液HBV颗粒。制备HBV特异性探针，以Southern印迹法检测细胞株内HBV核心颗粒DNA.结果获得含1.2倍体HBVDNA的重组载体，即pREP—HBV，该重组载体转染HepG2细胞后，获得5株潮霉素抗性细胞RHBV1～RHBV5.均能表达HBsAg和HBeAg.Southern印迹结果显示各株细胞均可见明显的杂交拖带，即存在HBVDNA复制中间体。细胞培养上清液浓缩后在电子显微镜下可见成簇的、直径约42nm的HBV颗粒及直径为22～26nm的球形颗粒。
由此得出结论成功建立了HBV稳定复制及表达的HepG2细胞株，目前细胞已传代50次，每3天1次。
