该项研究目的是研究钙结合蛋白S100A6对Wnt/β-catenin信号途径的影响及其机制。
方法采用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达、谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化融合蛋白GST-hS100A6;Westernblot和荧光素酶活性分析法检测S100A6对细胞内B—catenin水平和B—catenin/T细胞因子4(TCF4)活性的影响;GST-pulldown和Westernblot技术研究S100A6与该信号途径主要成员β-catenin、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、Dvl和Axin之间的相互作用。结果S100A6可致MG63和HCT116细胞β—catenin水平升高,并可使HEK293细胞β—catenin/TCF4活性增强;S100A6与β—catenin、GSK-36和Dvl之间存在着直接的相互作用,而与Axin之间无相互作用。
由此得出结论S100A6能够增强Wnt/β-catenin信号途径的活性,其机制可能涉及S100A6与该途径重要成员β—catenin、GSK-3β和Dvl之间存在着直接的相互作用有关。