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Apelin对人成骨细胞的作用

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  该项研究目的是研究apelin及其受体APJ在人成骨细胞的表达和apelin对成骨细胞的作用。

  方法采用RT-PCR和Western印迹法检测apelin和APJ在人成骨细胞的表达。用apelin处理人成骨细胞,^3H掺入法(^3H-TdR)和细胞计数法测定细胞的增殖,通过测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌水平和Ⅰ型胶原的生成来分析细胞功能。Western印迹法检测信号通路的激活。通过小分子干扰核糖核酸(siRNA)技术阻断APJ,观察其对细胞增殖和信号通路的影响。结果Apelin和APJ在人成骨细胞均有表达,Apelin能促进人成骨细胞增殖,但对其ALP活性、骨钙素的分泌和Ⅰ型胶原的生成无影响。通过siRNA技术阻断APJ能消除apelin对细胞增殖的促进作用。Apelin能诱导人成骨细胞磷脂酰肌醇3激酶(P13K)下游底物蛋白激酶B(Akt)的活化,但不能诱导c-junN一端激酶(JNK)、p38和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)等丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化。siRNA干扰APJ对Akt的活化起抑制作用。P13K抑制剂(LY294002)能消除apelin对细胞增殖的促进作用和Akt的活化。

  由此得出结论人成骨细胞表达apelin和APJ,Apelin通过APJ/P13K/Akt途径促进人成骨细胞增殖,但对其分化无影响。

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