该项研究目的是寻找一种能够对移植细胞进行在体示踪方法,为细胞的迁移、分布及心功能改善机制的研究提供更多的信息。
方法采用将超顺磁性氧化铁(SPIO)和骨髓间充质干细胞(MSCs)共同孵育培养36h.普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检验标记后细胞的活性;应用CostarTranswell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其分化能力。将标记的细胞移植到中华小型猪心肌内。通过心脏MRI进行连续的在体示踪观察。细胞移植后不同时期取动物心脏切片进行普鲁士蓝染色观察移植细胞。结果MSCs经铁离子标记后,普鲁士蓝染色标记效率〉95%,此试剂不影响细胞增殖,标记后98%的细胞保持活性,可继续培养、传代,迁移能力和分化能力未受影响。动态观察显示SPIO标记细胞在MRI影像上表现为低密度灶影或信号缺失,并且在移植后4周仍可显影。病理学检查可以看到移植细胞呈普鲁士蓝染色阳性,与影像学有很好的一致性。
得出结论磁共振对比剂SPIO可以安全、有效的标记骨髓间充质细胞,并可通过心脏MRI进行持续的在体示踪。