该项研究目的是明确我国部分地区产超广谱-β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qnrA基因的存在状况。
方法采用PCR扩增产ESBL菌株,包括263株大肠埃希菌和99株肺炎克雷伯菌的qnrA基因;测序分析其基因序列。琼脂稀释法测定10种抗菌药物对qnrA基因阳性菌株的最低抑菌浓度(MIC)。接合实验和Southern杂交进行基因定位。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析qnrA基因阳性株的同源性。结果263株大肠埃希菌中有5株检出qnrA基因,占1,9%;99株肺炎克雷伯菌中有8株检出qnrA基因,占8,1%。13株qnrA阳性株中qnrA基因均位于可接合性质粒上。13株菌株同时携带CTX—M基因(1株CTX—M-9、5株CTX—M-14和7株CTX—M-24)。qnrA基因阳性的接合菌与受体菌J53相比,环丙沙星对前者的MIC较后者提高了4~133倍。11株环丙沙星耐药株(MIC≥4mg/L)均存在GyrA亚基的83位氨基酸和(或)87位氨基酸改变,其中8株对环丙沙星高水平耐药株(MIC≥16mg/L)同时存在ParC亚基的80位氨基酸改变。2株MIC分别为4mg/L和2mg/L的菌株GyrA和ParC两亚基均未发生改变。
由此得出结论肺炎克雷伯菌中qnrA基因的携带率高于大肠埃希菌。qnrA基因单独作用仅导致低水平喹诺酮类耐药,合并gyrA和(或)parC突变导致喹诺酮类高水平耐药。