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抑郁大鼠海马的双向凝胶电泳图谱分析

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  该项研究目的是建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳技术分析海马组织差异蛋白质表达谱,为探索抑郁症的发病机制提供线索。

  方法采用雄性成年Spraguedawley大鼠10只,选择旷场实验法行为评分相近的大鼠随机分为模型组和正常组,每组各5只。对模型组大鼠采用慢性不可预见的轻度应激制作抑郁症大鼠模型,以行为学测试评估模型。三氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马组织蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,Image Master2D软件进行图像分析,MALDI—TOF—MS质谱仪鉴定蛋白质。

  结果蔗糖水实验:模型组大鼠饮用蔗糖水量在应激第15,22天[(68.3±2.9)ml,(65.6±3.9)ml]与正常组[(76.3±4.2)ml,(76.5±1.4)ml]的差异均有统计学意义(P均〈0.01)。旷场实验:模型组大鼠水平得分[(21.27±5.89)分]及垂直得分[(7.58±2.65)分]均低于正常组[(35.70±7.87)分,(11.56±2.45)分],差异均有统计学意义(P均〈0.01)。模型组平均蛋白质点数为(1609±15)点。正常组平均蛋白点数为(1616±30)点,匹配率为72%;其中27个蛋白点在两组间有显著的量的改变,集中在pH4.0~9.7和相对分子质量为25000—70000。质谱鉴定了4类共15个蛋白质,其中模型组4个与神经发生有关的蛋白质表达量明显下降。

  由此得出结论差异蛋白点的检测为抑郁症的发病机制及治疗靶点的选择提供了参考依据。

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