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中国研究者实验研究免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞

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  中国研究者探讨了免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞的可行性。研究者采用免疫磁珠细胞分选法去除羊水细胞中CD44和SSEA4阳性细胞,使OCT-4阳性胎儿干细胞间接得到分离,体外培养扩增后,观察细胞生长特性,免疫荧光染色计算OCT-4阳性胎儿干细胞得率,Real—TimePCR比较分离前后OCT-4表达量的差异,免疫组化检测NANOG、AKP、MAP-2、NGFR和Myosin等细胞因子的表达。结果发现经免疫磁珠分离的细胞接种12h内贴壁生长,形态呈梭形,部分呈多角形。融合后形成辐射状排列。免疫荧光染色OCT-4阳性细胞得率为(90.15±8.25)%,Real—TimePCR检测结果显示分离后细胞OCT-4的表达量较未分离细胞和M义有显著性差异(P〈0.01)。原代培养可获得(1~2)×107个细胞,3代可获得(2~4)×108个细胞。传至10代以后细胞的增殖能力下降。免疫组化结果显示OCT-4阳性胎儿干细胞表达NANOG、AKP、MAP-2和NGFR等细胞因子。由此,研究者得出结论,免疫磁珠细胞分选法可以从羊水中分离出OCT-4阳性的胎儿干细胞,分离后的细胞保持干细胞原有特性及生物学特征,可作为组织工程种子细胞。

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