除流行病史、贫血、嗜酸细胞增多及大便潜血外，主要依靠从粪便中检得虫卵以确定诊断。一般采用粪便直接涂片法（Kato氏法）可于镜下发现虫卵。直接涂片不易检得虫卵时，可采用饱和盐水漂浮法、四氯乙烯圆管法和过滤圆管法。虫卵计数法适合于调查研究及疗效考核之用，每克大便含卵少于2000个为轻度感染，2000～11000个为中度感染医学|教育网搜集整理；11000以上为重度感染。另外还可用培养法检查钩蚴以协助诊断。
钩虫病人血液中IgE、IgG和α2球蛋白显著升高。治疗后，因抗原刺激物质消除，免疫球蛋白可恢复正常，对评价疗效与流行病学研究有一定参考意义。
