1)骨骼肌细胞培养
1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。
2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。
3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,常用Hanks液配的0.01%明胶。
2) 肌细胞培养
1.选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以维持箱内温度),每日翻动一次(180度),孵育9~12天。
2.取鸡胎法相间《组织培养和分子细胞学技术》53页。
3.用眼科剪剪开胸腔,剥出心脏,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。
4.小心剪除大的动静脉,保留心室肌,用组织块或消化培养法均可。