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医学教育网临床医学检验技师《答疑周刊》2015年8期

医学教育网临床医学检验技师《答疑周刊》2015年8期:

【问题】细胞内胆固醇少了LDL受体会增加,为什么是负反馈调节??

LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL与LDL受体结合后,内吞入细胞,经溶酶体酶作用,胆固醇酯水解成游离胆固醇。若胞内胆固醇浓度升高,可通过:

①抑制HMGCoA还原酶,减少自身的胆固醇合成;

②抑制LDL-R基因的表达,减少LDL-R的合成,从而减少LDL的摄取;

③激活内质网脂酰基CoA胆固醇酰基转移酶(ACAT),使游离胆固醇在胞质内酯化成胆固醇酯贮存,从而控制细胞内胆固醇含量,使其处于正常动态平衡状态。因此为负反馈调节。

2免疫印迹法和斑点酶免疫吸附试验区别

免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。免疫印迹法(immunobiottingtest,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似,亦被称为Western-blot.

酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。

免疫印迹法和斑点酶免疫吸附试验两者的反应原理不同。免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术;而酶联免疫吸附试验是双抗体夹心法。因此两者还是不同的。

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【问题】Coombs试验的配血原理是什么?

凡Coombs试验即抗人球蛋白试验,是检测血液中温反应性抗体的一种方法,也是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要指标。温抗体中50%以上由IgG介导,其次为IgM,IgA和C3d等,因此本试验应分选各种单克隆抗体同时测定。Coombs试验分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应):直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体;间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。

(1)直接coombs试验用于检测已粘附在红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后,将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检红细胞悬液中,即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验,也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。

(2)间接coombs试验用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中,如果抗原抗体相应则发生结合,再加入抗球蛋白抗体,则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh(D)抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等,分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。

【问题】內源性溶血形成的复合物是FIXa还是FXIa?

凝血因子特性凝血因子目前包括14个,除FⅢ存在于全身组织中,其余均存在于血浆中。

根据理化性质分为四组。

(1)依赖维生素K凝血因子

包括FⅡ、FⅦ、FⅨ和FⅩ,其共同特点是在各自分子结构的氨基末端含有数量不等的γ-羧基谷氨酸残基,在肝脏合成中必须依赖维生素K。依赖维生素K凝血因子(依K因子)通过γ-羧基谷氨酸与Ca2+结合,再与磷脂结合,这是依K因子参与凝血反应的基础。

(2)接触凝血因子

包括经典FⅫ、FⅪ和激肽系统的激肽释放酶原(PK)、高分子量激肽原(HMWK)。它们的共同特点是通过接触反应启动内源凝血途径,并与激肽、纤溶和补体等系统相联系。

(3)对凝血酶敏感的凝血因子:

包括FⅠ、FⅤ、FⅧ和FⅩⅢ,它们的共同特点是对凝血酶敏感。

(4)其他因子

包括FⅢ、FⅣ。正常情况下,FⅢ不存在于血液中。FⅣ即Ca2+。凝血机制

凝血过程示意图

内源凝血途径

内源凝血途径(intrinsicpathway)是指由FⅫ被激活到FⅨa-Ⅷa-Ca2+-PF3复合物形成的过程。

外源凝血途径

外源凝血途径(extrinsicpathway)是指从TF释放到TF-FⅦa-Ca2+复合物形成的过程。

共同凝血途径。

【临床免疫学检验】

免疫学技术中的亲和层析法,利用抗原抗体反应哪个特点来纯化抗原或抗体

A.比例性

B.特异性

C.可逆性

D.亲和力

E.疏水作用力

【正确答案】C

学员提问:答案是D吧。

解析:可逆性:可逆性指抗原抗体结合后形成的,复合物在一定条件下可发生解离,恢复抗原抗体的游离状态。抗原抗体结合是分子表面的结合,犹如酶与底物的结合,是一种非共价键结合,结合虽稳定但可逆;抗原抗体的结合是一种动态平衡过程,抗原抗体复合物的解离取决于抗体对相应抗原的亲和力及反应条件(如离子强度、pH等)。免疫学技术中的亲和层析法就是利用这个原理来纯化抗原或抗体。因此答案为C。

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【临床微生物学

有关荚膜描述错误的是

A.具有免疫原性,可用于鉴别细菌

B.—般在机体内形成

C.具有抗吞噬作用

D.可增强细菌对热的抵抗力

E.化学成分可以是多糖,也可以是多肽等

【正确答案】D

学员提问:细菌夹膜一般是在机体内形成吗?不是某些细菌原来就存在的?

解答:细菌一般在机体内和营养丰富的培养基中才能形成荚膜。有荚膜的细菌在固体培养基上形成光滑型(s型)或粘液型(m)菌落,失去荚膜后菌落变为粗糙型(r)。荚膜并非细菌生存所必需,如荚膜丢失,细菌仍可存活。荚膜除对鉴别细菌有帮助外,还能保护细菌免遭吞噬细胞的吞噬和消化作用,因而与细菌的毒力有关。荚膜抗吞噬的机理还不十分清楚,可能由于荚膜粘液层比较光滑,不易被吞噬细胞捕捉之故。荚膜能贮留水分使细菌能抗干燥,并对其他因子(如溶菌酶、补体、抗体、抗菌药物等)的侵害有一定抵抗力。

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【临床血液学检验】

急性早幼粒细胞白血病细胞一般检测不到下列哪种融合基因

A.PML-RARα

B.PLEF-RARα

C.Bcr/abl

D.NPM-RARα

E.以上融合基因都检测不到

【正确答案】C

学员提问:请解释一下。

解答:慢性髓细胞性白血病(chronicmyeloidleukemia,CML)细胞有t(9;22)(q34;q11)易位形成的费城染色体(Phchromosome)和BCR/ABL融合基因,它们在血液病研究中占有重要地位。在发现Ph染色体后的30多年里,临床广泛用细胞遗传学方法检测Ph染色体做CML的诊断和疗效监测。尤其近十余年,分子生物学方法检测BCR/ABL融合基因的应用逐渐普及。因此急性早幼粒细胞一般检测不到Bcr/abl。

因此答案为C。祝您顺利通过考试!

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